Une thématique nouvelle s'est imposée pour le deuxième SCOT : il s'agit de l'élaboration d'une Trame Verte et Bleue (TVB), à même de préserver et restaurer la fonctionnalité écologique du territoire.
Une des premières actions du Syndicat mixte a été de s'engager dans un partenariat pour élaborer cette TVB sur le territoire autour du Ventoux, avec le Syndicat Mixte d'Aménagement et d'Équipement du Mont Ventoux (SMAEMV) et la COPAVO. Dès 2015, le travail a été conduit sur la base d'analyses cartographiques de l'occupation du sol (ce qui est favorable pour différents groupes d'espèces) confrontées ensuite aux connaissances scientifiques des acteurs locaux. Un travail d'animation spécifique auprès du monde agricole a été confié à la Chambre d'agriculture afin d'associer les agriculteurs à la démarche de TVB : ils sont souvent directement concernés par la préservation d'espaces favorables, conciliés avec l'activité économique des exploitations. Tout ce travail a été finalisé à l'été 2016.